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XL2-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

XL2-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:XL2-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
XL2-Blue菌株來(lái)源于XL1-Blue菌株,為Hte (high transformation efficiency)基因型,Hte是Stratagene開(kāi)發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型,已成功應(yīng)用于40 kd質(zhì)粒的構(gòu)建。Hte使得XL2-Blue適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化,降低片段大小的偏愛(ài)性,多用于文庫(kù)構(gòu)建。

更新時(shí)間:2022-01-18

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

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詳情介紹
品牌其他品牌貨號(hào)BFNC86010
規(guī)格10x100ul/50x100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅用于科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

XL2-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞


產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86010-01(10×100ul)/BFNC86010-02(50×100ul)

XL2-Blue:                                                       100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                       10μl

保存條件(保質(zhì)期):                               -80℃(6個(gè)月)


基因型

TetR Δ(mcrA)183 Hte [F? {proAB lacIq lacZΔM15 Tn10 (TetR) Amy CamR}] Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1





產(chǎn)品說(shuō)明

XL2-Blue菌株來(lái)源于XL1-Blue菌株,為Hte (high transformation efficiency)基因型,Hte是Stratagene開(kāi)發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型,已成功應(yīng)用于40 kd質(zhì)粒的構(gòu)建。Hte使得XL2-Blue適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化,降低片段大小的偏愛(ài)性,多用于文庫(kù)構(gòu)建。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdSMR突變導(dǎo)致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。lacM15的存在使XL2-Blue菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素和氯霉素抗性。

青旗生物生產(chǎn)的XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>109 cfu/μg DNA。


XL2-Blue化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞


操作方法

1. XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手bo打EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YTLB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YTLB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少14 h。


注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞適宜在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。




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