品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFNE90140 |
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規(guī)格 | 48T/96T | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 僅用于科研 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
產品名稱:猴雌激素(E)ELISA試劑盒
操作步驟
1.標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.加酶:每孔加入酶標試劑 100μl,空白孔除外。
4.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。
5.配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。
6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
7.顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
9.測定:以空白孔調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。樣本在使用前也要在室溫平衡 60 分鐘。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間盡量控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,盡量做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔第one孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
猴雌激素(E)ELISA試劑盒